القای جنین زایی میکروسپور در گوجه فرنگی (Lycoporsicum esculontum Mill) رقم میکروتوم

نویسندگان

چکیده

روش به نژادی هاپلوییدی کارآمدترین و سریع ترین روش جهت تهیه لاین های خالص می باشد. در این تحقیق، روش کشت میکروسپور به منظور توسعه پروتکل جنین زایی مطالعه گردید. اثر تنش های مختلف شامل سرما، گرما، گرسنگی و کلشیسین بر روی القای جنین زایی میکروسپور بررسی شد. میکروسپورها در مراحل مختلف نموی از غنچه های گل ضدعفونی شده، جدا گردیده و در محیط AT3 یا B، با و یا بدون کلشی سین، در درجه حرارت های مختلف و زمان های متفاوت کشت شدند. بعد از اعمال تنش، میکروسپورها به محیط تغییر یافته AT3 تکمیل شده با تنظیم کننده های رشدی انتقال یافته و در دمای 25 درجه سانتی گراد و شرایط تاریکی نگهداری شدند. نتایج نشان داد که مرحله نموی انتهای تک هسته ای میکروسپور، محیط B و روش همزن مغناطیسی به ترتیب مناسب ترین مرحله، محیط و روش جداسازی میکروسپورها بودند، ضمنا تیمار کلشی سین (25mM) به همراه تنش درجه حرارت پایین (4oC) به مدت 72 ساعت باعث القا جنین زایی و تقسیمات اسپوروفیتی در بیش از 35 درصد از میکروسپورهای کشت شده و نهایتا تشکیل کالوس و ساختارهای جنینی گردید.

کلیدواژه‌ها


عنوان مقاله [English]

Induction of Embryogenesis in Microspores of Tomato (Lycopersicum esculrntum Mill) cv. Microtom

چکیده [English]

Haploid breeding is the most efficient method for the production of pure lines. In this research, tomato microspore culture method was studied to develop an embryogenesis protocol. The influence of several stresses, i.e. low and high temperatures, starvation and colchicine applied on isolated tomato microspores on the induction of microspore embryogenesis was investigated. Microspores in different stages of development were isolated from surface-sterilized flower buds and cultured in medium AT3 or starvation medium B, with or without colchicine, at different temperatures for varying lengths of time. After the stress treatments, microspores were transferred to modified AT3 medium supplemented with phytohormones and incubated at 25°C in the dark. The results showed that the late-uninucleate stage microspore, B medium and magnetic stirring were the best developmental stage, medium and method, respectively for isolating viable microspores. Treatment with colchicine (25µM) in combination with low temperature at 4°C for 72h also induced more than 35% of the cultured tomato microspores to divide symmetrically forming calli and embryoids

کلیدواژه‌ها [English]

  • tomato
  • Microspore culture
  • embryogenesis
  • Colchicine and Haploid